含量試劑盒中亞硫酸鈉能夠還原Fe3+為Fe2+,Fe2+進一步與2,2’-聯吡啶顯色,產物在520nm處具有特征吸收峰,通過吸光值的變化即可定量檢測鐵的含量。
ATP廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細胞能量代謝狀態的主要參數。測定ATP含量并且計算能荷,能夠反映能量代謝狀態。
HK催化葡萄糖和ATP合成6-磷酸葡萄糖,6-磷酸葡萄糖脫氫酶進一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH,NADPH在340nm有特征吸收峰,NADPH和ATP含量成正比,以此反應ATP含量。
溶液的配制:
1.提取液低溫條件下,可能有結晶析出,放于60℃水浴加熱溶解即可,不影響使用。
2.試劑二:臨用前加入7mL蒸餾水充分溶解,可加熱促進溶解;
3.試劑四:臨用前取1支加入0.2mL蒸餾水溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復凍融;
4.試劑五:臨用前加入3.2mL蒸餾水充分溶解,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融;
5.試劑六:臨用前取1支加入0.25mL蒸餾水備用,用不完的試劑-20℃分裝保存2周,避免反復凍融;
6.標準品:5mgATP。臨用前加入0.826mL蒸餾水配成10μmol/mL的ATP標準溶液,用不完的試劑-20℃分裝保存4周,避免反復凍融;
7.工作液的配制:臨用前請按試劑二(mL):試劑三(mL):試劑四(mL):試劑五(mL):試劑六(mL)=1:1:0.1:0.4:0.1的比例配制(2.6mL,約10T的量),現配現用。